薄層色譜(TLC)是一種非常有用的跟蹤反應(yīng)的手段,還可以用于柱色譜分離中合適溶劑的選擇。薄層色譜常用的固定相有氧化鋁或硅膠,它們是極性很大(標(biāo)準(zhǔn))或者是非極性的(反相)。流動(dòng)相則是一種極性待選的溶劑。在大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)中,都將使用標(biāo)準(zhǔn)硅膠板。將溶液中的反應(yīng)混合物點(diǎn)在薄板上,然后利用毛細(xì)作用使溶劑(或混合溶劑)沿板向上移動(dòng)進(jìn)行展開。
柱層法棒狀薄層色譜根據(jù)混合物中組分的極性,不同化合物將會(huì)在薄板上移動(dòng)不同的距離。極性強(qiáng)的化合物會(huì)“粘”在極性的硅膠上,在薄板上移動(dòng)的距離比較短。而非極性的物質(zhì)將會(huì)在流動(dòng)的溶劑相中保留較長的時(shí)間從而在板上移動(dòng)較大的距離?;衔镆苿?dòng)的距離大小用Rf值來表達(dá)。這是一個(gè)位于0~1之間的數(shù)值,它的定義為:化合物距離基線(點(diǎn)樣時(shí)已經(jīng)確定)的距離除以溶劑的前鋒距離基線的距離。
柱層法棒狀薄層色譜實(shí)驗(yàn)步驟:
1)切割薄板。通常,買來的硅膠板都是方形的玻璃板,需要用鉆石頭玻璃刀按照模板的形狀進(jìn)行切割。在切割玻璃之前,用尺子和鉛筆在薄板的硅膠面上輕輕地標(biāo)出基線的位置(注意不要損壞硅膠面)。借助鋒利的玻璃切割刀和一把引導(dǎo)尺,你便可方便地進(jìn)行玻璃切割。當(dāng)整塊玻璃被切割后,你就可以進(jìn)一步將其分成若干獨(dú)立的小塊了。
?。ㄩ_始的時(shí)候,也許你會(huì)感到有一些難度,但經(jīng)過一些訓(xùn)練以后,你便會(huì)熟練地掌握該項(xiàng)技術(shù)。)
2)選取合適的溶劑體系。化合物在薄板上移動(dòng)距離的多少取決于所選取的溶劑不同。在戊烷和己烷等非極性溶劑中,大多數(shù)極性物質(zhì)不會(huì)移動(dòng),但是非極性化合物會(huì)在薄板上移動(dòng)一定距離。相反,極性溶劑通常會(huì)將非極性的化合物推到溶劑的前段而將極性化合物推離基線。